谷-胱甘肽—S 轉移酶測定試劑盒

（Glutathione S-transferase GST 比色法）

二、適用范圍:

本試劑盒適用于檢測血清、組織、培養細胞等中谷-胱甘肽-S 轉移酶的活性。

三、所需儀器:

可見分光光度計(412nm)、37℃恒溫水浴箱、低速離心機

四、樣本前處理

1、50 倍稀釋的溶血液的配制：取肝素抗凝全血 20μL，以雙蒸水稀釋至 1mL，混勻，放置 5 分鐘

進行測定。 配制好的溶血液要在 1 小時內測定完，否則影響酶活力；抗凝全血若當天來不及

測定可放冰箱 4℃保存，2～3 天內酶活力變化不大。

2、組織勻漿、線粒體、微粒體等的制備見實驗方法學部分。

3、血清或血漿可以直接取樣。

六、測定意義:

谷-胱甘肽 S—轉移酶（glutathione S—transferase GST）是一類與肝臟解毒有關的酶，在肝細

胞中存在量很大，所以當肝細胞受損害時，GSH-ST 常常很早釋放到血中，血中 GSH-ST 的升高

常常早于谷丙轉氨酶（SGPT）和谷草轉氨酶（SGOT），因而 GSH-ST 的升高可作為肝臟損傷的

敏感指標。

谷-胱甘肽 S—轉移酶廣泛存在于哺乳動物各組織中，催化谷-胱甘肽（GSH）與化學物質的親

電子基團結合，最-終形成硫醚氨酸排出體外，在體內解毒功能上起重要作用。

GSH-ST 具有消除體內氧化物及解毒雙重功能。GST 在谷-胱甘肽氧化物酶（GSH-PX）

活力低下的條件下，只有清除體內脂質氧化物（LPO）的功能。

七、測定原理:

谷-胱甘肽+1-氯-2,4-*

GST

谷-胱甘肽*復合物+鹽酸

(GSH+C6H3（NO2）2Cl)

GST

C6H3（NO2）2GS+H++Cl -

GST 具有催化還原型谷-胱甘肽（GSH）與 1-氯-2,4-*（CDNB 底物）結合的能力，

在一定反應時間內，其活性高低與反應前后底物濃度的變化呈線性關系。

本實驗通過檢測 GSH 濃度的高低來反應 GST 活力的大小，GSH（底物）濃度降低越多則

GST 活力越大。

八、注意事項:

1、管子要洗干凈，先用溫肥皂水刷凈，再用自來水沖 20 遍以上，最后用雙蒸水過 1-2 次后烘干

即可。

2、2 號試劑配制時要加熱充分溶解（溫度可達 90℃～100℃）。

3、肝素抗凝全血放置冰箱存放時間不可超過 3 天，血漿、組織塊放-20℃可保存一個月以上。

4、1 號試劑配成貯備液后，冰箱冷藏至少可保存一個月。

5、1mmol/L 的 GSH 底物現用現配。

6、上清液當天提取，當天測試。

7、組織蛋白的測定方法有多種，本研究所有供應。

8、樣品前處理參照實驗方法學部分。

9、本試劑盒僅用于科研、實驗室。

10、正式實驗前最-好選取 2 例相對差異較大的樣本進行預試，以熟悉操作和確定樣本濃度（最

佳樣本濃度為對照管OD-測定管OD在0.2左右時為宜，不稀釋時達不到0.2則直接原液操作）。

谷-胱甘肽—S 轉移酶測定試劑盒